EP 8: Κεφάλαιο 4: Η τεχνολογία του ανασυνδυασμένου DNA
Βιολογία...αλλιώςΣχετικά με αυτό το επεισόδιο
Ύλη τεύχους Β: Κεφάλαιο 4: Η τεχνολογία του ανασυνδυασμένου DNA. Ένα χορταστικό επεισόδιο για το ανασυνδυασμένο DNA, τις γονιδιωματικές και τις cDNA βιβλιοθήκες, καθώς και τη μέθοδο PCR. Καθιερωμένα συνδυαστικά θέματα και fun facts συμπεριλαμβάνονται!
Αυτόματη μεταγραφή — ενδέχεται να περιέχει λάθη.
Αγαπημένοι μου υποψήφιο των Σπουδών για γεια σα ⁇ . Είμαι η Ρωη Βιδούρι. Είμαι Βιολόγο ⁇ και αυτό είναι ένα podcast για την επανάληψη τη ⁇ βιολογία ⁇ προσαλισμού. Σα ⁇ καλωσορίζω και σα ⁇ καλό να κάνουμε μαζί ένα ταξίδι επανάληψη, μαζί με τρίδια, fun facts, tips και συνδυαστικά θέματα. Αυτό είναι ένα podcast για να ακούτε βιολογία, όσο μελετάτε στο γραφείο σα ⁇ , περπατάτε, γυμνάζετε και για να εξασκίσετε όποτε σα ⁇ αρέσει.
Επιτρέψτε μου να αφιερώσω αυτή τη προσπάθεια στου ⁇ δικού ⁇ μου μαθητέ ⁇ που πάντα με ευνέν για να κάνω το καλύτερο δυνατό. Για πληροφορίε ⁇ απορίε ⁇ και επισμάτη ⁇ , μην διστάσετε να επικοινωνήσετε μαζί μου στο email ροηβού. Και για όσου ⁇ φίλου ⁇ μα ⁇ βρίσκονται στο Ηράκλειο Κρήτη ⁇ θα μα ⁇ βρείτε στο φροντιστήρια καινοτόμε ⁇ μάθηση στο κεντρικό κτίριο ρυσινέυ 69 και λαστέ 21, αλλά και στα παρατήματα μα ⁇ 3 Μωσε 7 και Νίκοκα Σατζάκι στι ⁇ Γούρνε Σιρακλείου.
Λοιπόν, σήμερα θα μιλήσουμε για ένα κεφάλαιο, θα έλεγα έτσι μικρό σταθερή, αλλά θαυματιό. Είναι το κεφάλι 4. Αυτό τη τεχνολογία του ανασυνδιασμένου DNA. Μετά την ανακάλυψη τη διπλή έλλεισου και κρύκ βλέπετε διατύπωσαν τη δομή του DNA που έχουμε πει και πρωτύτερα. Ακολούθησαν πάρα πολλέ ανακαλύψει που είχα να κάνουν με την αντιγραφή, τη μεταγραφή, τη μετάφραση.
Γενικά με την έκφραση τη πληροφορία και τότε άρχισαν οι ερευνητέ να ανοίγουν και κάποια άλλα παραφηράκια για την επεξεργασία του γενετικού υλικού. Σε αυτό μεγάλη βοήθεια προσέφαν δύο πολύ σημαντικέ ανακαλύψει και μιλάω για τι περιοριστικέ ενδωνάσει, τα μαγικά μοριακά σελίδια, τα οποία μπορούσαν να κόβουν αλληλχίε DNA. Και φυσικά του φορεί κλονοποίηση που ήταν όρια DNA που μπορούσαν να μεταφέρουν DNA από ένα κύτταρο σε ένα άλλο κύτταρο.
Με βάση λοιπόν αυτέ τι δύο σπουδέ ανακαλύψει. Καταφέραμε κατάφεραν οι άνθρωποι να αναπτύξουν την τεχνολογία του ανασυνδιασμένου DNA, δηλαδή να μπορούν πλέον να παρεύουν και να τροποιήσουν το γενετικό υλικό. Και γιατί όλα αυτά, μια χαρά ήταν ήσυχο ήσυχο το γενετικό υλικό. Έλα όμω που αυτή η τεχνολογία μα ⁇ βοήθησε να παράγουμε βελτιωμένων ιδιοτήτων φυτικά και ζωικά προϊόντα και ήταν μια τεχνολογία η οποήθηκε κατακόρων στι γενετικέ τροποποίησει.
Βλέπε και κεφάλαια. Τι είναι όμω ένα ανασυνδιασμένο DNA. Λέμε, Πόλε ⁇ φορέ η τεχνολογία του ανασυνδιασμένου DNA τι σημαίνει αυτό. Ανασυνδιασμένο DNA είναι ένα τεχνητό μόριο DNA το οποίο περιέχει γονίδια από δύο ή παραπάνω οργανισμού. Το DNA αυτό μπορεί να το εισάγω σε βακτήριο ή σε ευκαιο κύτταρο. Και στη συνέχεια, τα γενετικά τροποποιημένα βακτήρια ή ευκασιωτικά κύτταρα μπορούν να ζουν και να αναπαράγονται, μεταφέροντα στου απογόνου του τι επιπλέον νειδιότητε ⁇ .
Όλα αυτά εντάσσονται στο κομμάτι τη γενετική μηχανική. Η γενετική μηχανική είναι το σύνολο των τεχνικών με τι οποίε ο άνθρωπο επενβαίνει στο γενετικό υλικό με δύο θεμελιώδη σκοπούου. Την κατανόηση των μυστηρίων τη ζωή και τη εξέλιξη που είμαστε που πάμε γιατί υπάρχουν κλπ. Και φυσικά τη βελτίωση τη υγεία και του τρόπου διαβίωση.
Καθότι οι τεχνικέ αυτέ μα βοηθάνε να παράγουμε προϊόντα τα οποία χρησιμοποιούνται στην ιατρική στην γεωργία, στην κτινοτροφία και σε άλλου τομεί. Μακούτε τώρα λίγο στην εισαγωγή να πηγαίνω έτσι όχι με πολύ μεγάλη τάση φλειαρία. Γιατί αυτό είναι ένα κεφαλό το οποίο μα δίνει ασκήσει. Μα δίνει μεθοδογίε. Οπότε δεν είναι άμεσα η προτεραιότητά μου σε αυτή τη φάση να μιλήσω για όλε αυτέ τι υπέροχε ανακαλύψει που έγιναν τότε για τη τεχνολογία του ανασυνδιασμένου DNA.
Έχω επιλέξει να ρίξω λίγο το βάρω περισσότερο στην εβάθυνση στο basic κομμάτι, δηλαδή στο κομμάτων των βιβλιοθυν περισσότερο. Εντάξει, Αυτό το λέω σαν παρατήρηση, γιατί ίσω έχετε συνηθίσει να μα ακούτε λίγο πιο περιγραφική με περισσότερε λεπτομέρειε όσον αφορά ειδικά τι ανακαλύψει. Προτού πάμε όμω στο βασικό κομμάτι αυτή τη θεωρία θέλω λίγο να κατανοήσουμε την έννοια των γωνιωματικών βιβλιοθικών και το νόημα των γωνιωματικών βιβλιοθικών.
Πολλοί μα αυτέ με ρωτάνε για ποιο λόγο δασκόμαστε γωνιωματικέ βιβλιοθήκε λίγο ξεπερασμένο όλο αυτό κλπ. Η γωνιωματική βιβλιοθήκη, μπορώ να σα πω ότι είναι μια συλλογή από όλα τα κομμάτια DNA ή σχεδόν όλα τα κομμάτια του γωνιώματο ενό οργανισμού τα οποία κλονοποιούνται σε πλασμήδια ή σε άλλου φορεί και φιλοξενούνται σε κύτραξενιστέ σε βακτήρια ή σε άλλου οργανισμού.
Φανταστείτε μια πολύ μεγάλη βιβλιοθήκη με πραγματικά βιβλία. Όπου το κάθε βιβλίο να έχει ένα γράμμα του ελληνικού αλφάβητου, χιλιάδε εκατομμύρια φορέ σε όλε του τι σελίδε μόνο αυτό. Και το διπλικό του βιβλίο ένα άλλο γράμμα. Πάλι σε όλε τι σελίδε, πάλι παντού, πάλι μόνο αυτό. Και το σύνολο των βιβλίων να έχουν τα συνολικά γράμματα, όλα τα γράμματα του ελληνικού αλφάβητου, αλλά κάθε βιβλίο ένα άλλο γράμμα.
Καταλάτε, κάντε λίγο έτσι ένα poλλό σα για να το καταλάβετε. Φανταστείτε ότι παίρνετε το DNA ενό οργανισμού, το κόβετε σε χιλιάδε κομμάτια και κάθε κομμάτι το βάζει σε ένα διαφορετικό βιβλίο. Όλη η βιβλιοθήκη λοιπόν μαζί αποτελεί τη γωνιωματική βιβλιοθήκη. Κάθε βιβλίο έχει ένα άλλο κομμάτι, το ίδιο όλε τι σελίδε του, πάρα πολλέ φορέ.
Το δίπλα το βιβλίο είναι άλλο κομμάτι. Και το σύνολο των βιβλίων όλα τα κομμάτια. Γιατί να το κάνουμε αυτό, μπορείτε να μελετήσετε ένα γονεί. Μπορεί να μελετηθεί ένα γονεί το οποίο ακόμα δεν το έχουμε ερευνήσει, δεν το έχουμε χαρακτηρίσει. Μπορείτε να κάνετε ακόμα και έκφραση, αν εντάξει, το σχολικό προτείνει τη γωνιωματική πιο πολύ για έρευνα.
Τώρα, ένα fan fact είναι ότι πριν την εποχή τη αποκικοποίηση του γενετικού υλικού και τη αλληλόγηση του συνολικού γωνιώματο, οι επιστήμονε ήταν σαν να ψάχναν, αλλά χωρί να έχουν όλα τα τεχνολογικά μέσα. Οπότε ουσιαστικά φτιάχναν τι βιβλιοθήκε αυτέ. Το παίζανε οι ρακίε που αρώ. Και μέσα σε αυτέ, στα τη φλά εντό ή εκτό εισαγωγικών, ψάχναν ένα συγκεκριό με τη βοήθεια, βέβαια ανιχνευτών.
Ξέρω ότι μπορεί να σα φαίνεται πολύ old fachio αυτό, πολύ υπαλιά σχολή. Αλλά είναι ο θεμέλο λήθο στη τεχνολογία του ανασυνδέσμένου DNA, όλο αυτό δηλαδή που αναπτύχθηκε μετέπιτα. Το σχολικό βιβλίο επιλέγει να παρουσιάσει πρώτα με σύντομο τρόπο τα βήματα τη μεταφορά γενετικού υλικού από ένα κύτταρο σε ένα άλλο κύτταρο. Και στη συνέχεια να αναφερθεί ξεχωριστά σε κοντιματικέ και σε DNA βιβλιοθήκη, στο ότι θα κάνουμε και εμεί.
Τα στάδια μεταφορά ⁇ γενετικού υλικού από ένα κύτταρο σε ένα άλλο κύτταρο. Σε βασικό επίπεδο είναι τέσσερα. Δηλαδή, έχουμε δημιουργία του ανασυνδιασμένου DNA. Τι σημαίνει αυτό, απομονώνουμε το υλικό DNA του λεγόμενου οργανισμού δότη. Το κόβουμε με τη βοήθεια των περιοριστικών ενδοκλασών. Και το ενώνουμε με του ⁇ φορεί κλονοποιήσει.
Και μιλάμε κυρίω για πλασμήδια ή φάγου ⁇ . Ένα DNA το οποίο μπορεί να φτοπλασιάζεται ανεξάρτητα μέσα σε ένα κύτταρο ξενιστή όπω είναι τα βακτήρια. Το δεύτερο βήμα είναι η μεταφορά του ανασυνδιασμένου DNA σε ένα κύτταρο ξενιστή. Αυτή η διαδικασία λέγεται μετασχηματισμό. Η εισαγωγή δηλαδή του ξένου DNA σε βακτήριακό ξενιστή λέγεται μετασχηματισμό.
Τρίτο βήμα επιλέγουμε και απομονώνουμε τα κύτρα ξενιστέ ⁇ . Δηλαδή ξεχωρίζουμε αυτά που έχουν προσλάβει ένα συνδυασμένο DNA από εκείνα που δεν το έχουν προσλάβει. Κάθε βακτήριο που έχει προσλάβει ένα ανασυνδιασμένο DNA μόριο, πολλασιάζεται και δημιουργεί μια ποικία. Εδώ τώρα όρο σα ποικία με τον όρο κλώνοσ συμπείπτουν γιατί τα βακτήρια αυτού του κλώνατου θα περιέχουν όλα το ίδιο ανασυνδιασμένο κομμάτι DNA.
Άρα με τη συγκεκριμένη διαδικασία δημιουργούνται χιλιάδε ⁇ κλώνοι όπου καθένα ⁇ περιέχει ένα ανασυνδιασμένο μόριο DNA, διαφορετικό από τον υπολύπων κλώνα. Τέλο ⁇ , η επιλογή του επιθυμητού κλώνου θα γίνει με τη βοήθεια μορών ανοιχτών με τρόπο που θα πούμε παρακάτω. Εδώ λοιπόν είδαμε σύντομα ποια είναι τα βήματα, επισημα ότι κλώνοσ είναι μια ομάδα πανοιώτυπων πορών κοιτάρων οργανισμών.
Άρα μπορεί να έχουμε κλώνα ⁇ DNA, μπορεί να έχουμε κλώνα βακτηριακού μπορεί να έχουμε και κλώνονισμού. Βλέπει το προβατάκι, την τόλη. Πάμε τώρα να μιλήσουμε για τη γωνιωματική βιβλιοθήκη και ότι αυτοί αφορά διαδικασία κατασκευή και ότι χρησιμοποιείται τέλο ⁇ πάντων σε αυτοί. Οι περιοριστικέ ενδοδοκάσει είναι τα μοριακά ψαλίδια και είναι τα βασικά μα εργαλεία στην κατασκευή του ανασυνδιασμένου DNA και τα ένδειγμα που κατά κύριο λόγο χρησιμοποιούνται σε πρώτη φάση στην κατασκευή τη γωνιωματική βιβλιοθήκη.
Οι περιοριστικέ ενδοδοκάσει είναι ένιμα που παράγονται από βακτήρια με φυσιολογικό ρόλο την προστασία του κιτάρου από την ισβολή ξένου DNA. Και τι εννοούμε όταν λέμε εσβολή ξένου DNA στα βακτήρια, μιλάμε κυρίω για του ⁇ βακτήριο φάγου. Έτσι που στέλνει το γενετικό του υλικό μέσα στο βακτήριακό κύτταρο. Μια περιοριστική ενδοκοκιάση αναγνωρίζει ειδικέ αλληλοχίε 4 όνκων του κλετηδίων πάνω στο δίκλωνο DNA και κόβει πάνω σε συγκεκριμένε θέσει.
Πιο α πούμε διάσημη περιοριστική είναι η έκονα. Η έκοάν απομονώθηκε από το βακτήριο εσαιρικό. Και όποτε συναντήσει την αλληλοχία 5GATC τρία τόνο και τη συμπληρωματική τη, κόβει σπάζοντα του δεσμού ανάμεσα σε τσέ και άλφα. Αφήνοντα ⁇ μονόκλωνα άκρα από αζευγάρωτε ⁇ βάσει. Αυτά τα άκρα λέγονται στίκι ένθει ή αλλιώ σκοτώ διάκρα.
Και μπορούν να δημιουργήσουν δεσμό σιδρογόνου με τμήματα DNA που έχουν κοπεί από το ίδιο ένιμα. Άρα σιγά σιγά αρχίζεται και καταλαβαίνετε πώ το DNA του οργανισμού δότη όταν θα κοπεί από μία περιοριστική ενδοχάση θα ενωθεί με το DNA του φορέα. Α ⁇ κάνουμε τώρα μία στάση πρώτη να μιλήσουμε λίγο για περιοριστικέ ενδοδοκράσει.
Το πρώτο σχόλιο που έχω να κάνω είναι ότι οι αλληλοχίε αναγνώριση είναι παλύνθρωμε. Δηλαδή ότι διαβάζετε από τα αριστερά προ τα δεξιά, διαβάζεται και από τα δεξιά προ τα αριστερά στην πάνω και κάτω αλυσίδα. Αυτό σα το λέω για πολλαπλή και για ασκήσει τι οποίε ⁇ μπορεί το ένα άκρο να μην δίνεται και να σου λέει γράψε την αλληλοχή αναγνώση.
Οπότε δεν μαντεύουμε, βλέπουμε απλά τι υπάρχει πάνω δεξιά, το βάζουμε κάτω αριστερά. Μπορεί να σα ακούγεται λίγο μπερδευτικό, αλλά ουσιαστικά απλά πρόκειται για ένα είδο συμμετία που χαρακτηρίζει τι θέσει κοπή ή αλληλοχία αναγνώριση. Ένα άλλο ερώτημα το οποίο συχνά συναντάμε είναι ότι αφορά το μέγεθο τη αλληχία αναγνώριση σε σχέση με το πλήθο των τυμάτων και το μέγεθο των τυμάτων DNA που δίνει ενώ μεγάλη είναι η αλληλοχή αναγνώση μια περιοριστική ενδοχάση, τόσο σπανότερα αυτή αναμένεται να δρά πάνω στο γονιδήωμα.
Άρα θα μου δώσει λιγότερα κομμάτια τη νη και μεγαλύτερου μήκου. Τώρα, αν έχω μια πιο μικρή αλληλοχή αναγνώριση. Αυτή θα συναντάτε πιο συχνά πάνω στο γονιδίωμα. Οπότε θα έχει πιο πολλά κομμάτια και πιο μικρά. Δηλαδή, αν έχω μία λειτουργία αναγνώση των τεσσάρων ζευγων βάσεων συγκριτικά με μία των 8, σίγουρα αυτή το τεσσάρων θα συναντάτε πιο συχνά.
Άρα θα μα δίνει περισσότερα κομμάτια και μικρότερο μήκου. Ένα άλλο πράγμα που θέλω να σχολιάσω πάλι πάνω στι ⁇ περιοριστικέ είναι δώστε προσοχή στα αξιοποιήσιμα τμήματα. Τι σημαίνει αξιοποιήσιμα τμήματα. Όταν θα κόψει μια περιοριστική δύο φορέ σε ένα γραμικό DNA θα πάρει τρία κομμάτια. Αλλά τα δύο ακραία κομμάτια δεν μπορούν να ενσωματωθούν χωρί ⁇ υπεξεργασία.
Άρα για δύο θέσει κωπή παίρνω τρία κομμάτια. Όμω, παίρνω μόνο ένα αξιοποιήσιμο κομμάτι. Ένα κομμάτι θα έχει εκατέρωθεν την αλλοχία κοπεί. Αντιθέτω τώρα να έχουμε κυκλικό μόριο, όλα τα κομμάτια αξιοποιούνται, δηλαδή, εισάγονται σε φορέ χωρί επεξεργασία. Σα συμβουλευω βέβαια τώρα για αυτό το σημείο των τιμάτων που προκύπτουν.
Να χρησιμοποιήσετε ένα απλό σχηματάκι καθώ μιλάμε, δηλαδή την ώρα που μιλάμε. Τραβείστε μια γραμμή, βάλτε πάνω δύο θέσει να δείτε τι κομμάτια προκύπτουν. Εντάξει, υπάρχουν πολλέ ερωτησούλε που αφορούν τη δράση των περιοριστικό. Εντάξει, όλα αυτά είναι δουλεμένα στο μάθημα, έχετε ξασχιστεί πολύ σε αυτά. Δεν σα φοβάμαι καθόλου.
Απλά οφείλωσε λίγο να τα πω στο πλαίσιο τη επανάληψη. Όσον αφορά τώρα το αν η έκονα μπορεί να κόψει το γονειδίο με τη σερχια κόλη. Ελπίζω να πατάτε όχι, γιατί θα ήταν καταστροφικό αυτό. Η εσρήχια κόλη τροποποιείται τι αλληλογίε αναγνώριση ώστε να μην τι αναγνωρίζει η έκονα. Τέλο, για τι περιοριστικέ ενώ τέλο. Προσέξτε και του δεσμού που σπάνε με τη δράση των περιοριστικών.
Τραβήξτε όμορφα τι γραμμέ σα και μετρήστε πόση φωσφοδιά εστερική σπάνε, που συνήθω είναι δύο. Και πόσε δεσμοί υδρογόνο. Πόσο δεσμών υδρογόνου προκαλείται η διάσταση από τη δράση ενό συντ. Εντάξει, όλα αυτά για τι περιοριστικέ. Ελπίζω να μην σα φάνηκαν δύσκολα. Απλώ θέλουν οργανωμένη σκέψη και θέλουν σχηματάκια. Πάμε να δούμε τώρα τι θα γίνει παρακάτω.
Γιατί σα είπα πριν ότι θα κοπεί το DNA του δότη, θα κοπεί ο φορέ και θα συνδεθούν τα τμήματα που έχουν προκύψει. Μην ξεχνάτε ότι η αλληλοχί, εδώ τώρα το σχολικό μα μιλάει για την έκοάν. Θα υπάρχει διάσυρη πάνω στο γωνιο δύο μάρα. Με τη δράστηκα θα πάρω χιλιάδε κομμάτια. Στη συνέχεια, τα κομμάτια αυτά θα γίνει η προσπάθεια να ενσωματωθούν σε ειδικού ⁇ φορεί ⁇ χαρακτηριστικότερη τύπη φορέων πλασμήδια και DNA φάγων.
Βασική προπόθεση χρήση ⁇ πλασμηδίων ω ⁇ φορέ ⁇ κλονοποιήσει ⁇ είναι να έχουν τη συγκεκριμένη αλληλοχία μία μόνο φορά. Οπότε τα πλασμμύδια θα κοπούν, θα δημιουργηθεί ένα γραμικό μόριο DNA με μονόκλωνα άκρα με στίκη en όταν τα δύο ήδη DNA και πλασμηδίου θα αναμειχθούν λόγω τη ⁇ συμπληρωματικότητα και με τη βοήθεια ενό ενζήμου γνωστούσα από την αντιγραφή που δεν είναι άλλο από την DNA δεσμάση.
Θα συνδεθούν μεταξύ του ⁇ δημιουργώντα ανασυνδιασμένα πλασμίδια. Φυσικά εδώ υπάρχει ένα παραθειράκι. Μερικά πλασμίδια ξαλνουν χωρί να προσλάβουν ξένο DNA. Άρα σε αυτό το βήμα τη ⁇ κατασκευή του ανασυνδιασμένου DNA έχω τη δημιουργία ανασενδιασμένων πλασμηδίων και έχω και μία ανασυνδιασμένα πλασμήδια, τα οποία θα έχουν τι ⁇ ιδιότητε που έχει αρχικά οφορέα.
Δηλαδή δεν επηρεάζεται τίποτα. Δεν επηρεάζεται κανένα γονείδιο μάρτυρα. Τι είναι ο γονείο μάρτυρα, γονείο ανθεκτικότητα, σε κάποιο αντιβιωτικό ή α πούμε ένα γονεί το οποίο δίνει ένα χαρακτηριστικό παράγει ένα χρώμα. Βγάζει ένα αυτορισμό. Εντάξει. Είναι απαραίτητο το DNA του δότη και του φορέα ανακοπεί από την ίδια περιοριστική ενδέλουν κλάση.
Η θεωρία μα λέει πω ναι. Ωστόσο, μπορεί να υπάρχουν κάποιε ασκήσει τι οποίε επιλέγουμε εμεί την περιοριστική και κάνουμε γενικώ τη ζωή μα είναι λίγο δύσκολο. Σε αυτό θα πρέπει να σκέφτεστε ότι αρκείμεν στην ουσία, τα μονόκλο άκρα να μπορούν να συνδεθούν μεταξύ του. Να έχω δηλαδή συμπληρωματικά άκρα. Στη συνέχεια τι θα συμβεί, αφού κατασκευάστηκε το ανασενδιασμένο DNA, πάμε στο βήμα τη εισαγωγή του μέσα σε ξενιστέ.
Τα βακτήρια ξενιστέ δέχονται σε μικρό ποσοστό πλασμήδια, μερικά από τα οποία είναι ανασυδριασμένα. Προσέξετε, πολύ αυτή τη φράση του σχολικού. Μπορεί να έχει εντό εκτό εισαγωγικών κατηγορηθεί ότι δεν τα λέει πάντα αναλυτικά. Σε αυτή τη φράση ακριβολογεί μέχρι τελευταίο γράμματο. Δηλαδή τι σου λέει ότι κοίταξε να δει. Ο μετασχημό είναι μια διαδικασ δύσκολη.
Δεν θα έχει πολλά βακτήρια που έχουν πάρει το DNA σου, αυτό σου λέει. Και ουσιαστικά σου αφήνει να εννοηθεί ότι δημιουργούνται τρει πληθυσμοί βακτηρίων. Αυτό μεθοδολογικά και ασκυσιακά σίγουρα το έχετε δει. Δηλαδή, έχω τα βακτήρια που δεν μετασχηματίζονται καθόλου, έχω αυτά που μετασχηματίζονται με μία ανασυνδιασμένο DNA και έχω και αυτά που μετασχηονται με το ανασενδιασμένο DNA.
Τρει ⁇ πληθυσμοί που συνήθω τι ασκήσει ⁇ αποστολή μου είναι να του ξεχωρίσω με βάση τι ⁇ ιδιότητε του πλασμηίου που έχω. Συνήθω χρησιμοποιούνται ξενιστέ βακτήρια που δεν έχουν δικά του πλασίδια, άρα που δεν είναι από μόνα του ανθεκτικά σε κάποιο αντιβιωτικό. Και για να εισέλθετε το πλασμή μέσα στο βακτήριο. Τα τηχώματα του βακτήου γίνονται παροδικά διαπερατά σε μακρομόρια έπειτα από κατάλληλη κατεργασία.
Άρα μιλάω για τη διαδικασία του μετασχηματισμού. Και πάμε να μιλήσουμε λίγο για επιλογή. Τι ενώ τα λέω επιλογή. Επιλογή των βακτήριων που προέλαβαν το επιθυμητό DNA. Εδώ η μεθόδολογία τώρα γίνεται λίγο πιο δύσκολη ηχητικά ενώ. Οπότε σα παρακαλώνει μπροστά σα σε κάποιο χαρτί ή να έχετε την εικόνα 41 του σχολικού μπροστά σα.
Γιατί σε αυτό το παράδειγμα θα χρησιμοποιήσω εγώ. Σκεφτείτε λοιπόν ότι έχετε ένα πλασμίδιο καλή ώρα από την εικόνα 41. Το οποίο έχει δύο γονίδια μάρτιρε. Τι σημαίνει γονείδια μάρτυρα, είπαμε, γονίδια που δίνουν κάποια ιδιότητα για να σε βοηθήσουν στη διαδικασία τη επιλογή. Εδώ έχουμε γονείδιο ανθεκτικότητα στην αποικιλήνη και έχουμε και ένα γονίδιο που δίνει πλέον χρώμα στι αποκίε ⁇ των δακτρίων.
Αυτά, όλα ισχύουν όταν δεν έχει έλθει καθόλου DNA στο πλασμή. Και έχουμε τη θέση αναγνώριση τη περιοριστική μέσα στο γονίδιο τη χρωστική. Άρα, κατά τη διαδικασία κατασκευή του ανασυνδιασμένου DNA, δημιουργούνται δύο είδη πλασμηιδών. Τα ανασενδιασμένα, τα οποία προσλαμβάνουν το ξένο DNA, εδώ είναι προκειμένου μέσα στο γονείδιο τη χρωστική.
Οπότε ακυρώνεται η χρωστική και διατηρείται ανέποβο το γονείο τη ανθικτικότητα στην αντικιλύνη. Τώρα, τα πλασμίδια που ξανακλείω. Είναι τα μία ανασυνδιασμένα, τα οποία έχουν τι αρχικέ του ιδιότητε, όπω είναι κανονικά, οφορέα, χωρί καμία αλλαγή. Κάτω το μετασχηματισμό, θα δημιουργηθούν τρει πληθυσμοί βακτηρίων. Είναι τα μην μετασχηματισμένα κύτταρα.
Αυτά δεν έχουν προσλάβει κανένα πλασμή ούτε ένα συνδυασμένο, ούτε μία ανασυνδιασμένο. Άρα δεν έχουν ούτε ανθεκτικότητα, ούτε ενεργογωνίδιο χρωστική. Δεν είναι άχρημε αποκεί. Ένα δεύτερο είδο βακτήριων που δημιουργείται είναι αυτά που προσέλαβαν πλασμήδια, αλλά μία ανασυνδιασμένα. Αυτά τα λέω με τα σχηματισμένα με μία ανασυνδιασμένο πλασμήδιο.
Που σημαίνει ότι πήραν πλασμήδια όπω ήταν στην αρχή. Δηλαδή, με ενεργό γονεί ανθκτικότητα και με ενεργό γονεί χρωστική. Αυτά θα είναι ανθεκτικά στην αποικυλύνη και θα δίνουν εμπλέσει. Τρίτο ⁇ και τελευταίο πληθυσμό, ο λεγόμενο επιθυμητό πληθυσμό, είναι τα βακτήρια που είναι μετασχηματισμένα με ένα συνδυασμένο πια DNA. Δηλαδή είναι ανθεκτικά στην αντικιλήνη, αλλά παράγουν άχμε αποικίε ⁇ γιατί το γονείο τη χρωστική έχει ακυρώσει η εισαγωγή του ξένου DNA.
Άρα πώ ⁇ κάνω επιλογή σε αυτή την περίπτωση των επιθυμητών βακτήρων. Βάζω την εμπειλήνη, πεθαίνουν τα με τα σχηματισμένα που δεν έχουν καθόλου ανθεντικότητα. Και στη συνέχεια βλέπω μπ και άχρομε. Οι άχρονε θα είναι αυτέ που έχουν το ανασενδιασμένο DNA διότι η εισαγωγή του ξένου DNA καταργεί το γονίδιο τη χροστική. Δεν είναι δύσκολο κομμάτι αυτή τη διαλογή απαιτεί αυστηρή μεθοδολογία βήμα βήμα και μπορεί να σα δωθεί αντί για γονείο χρωστική σε ένα δεύτερο γονεί ανθτικότητα αντιβιωτικού ή ένα γονεί άλλη ιδιότητα.
Μόνο η ιδιαίτερότητα είναι στην περίπτωση που έχουμε δύο αντιβιωτικά. Το γεγονό ότι σίγουρα ο επιθυμετώ πληθυσμό θα πεθαίνει από τη χρήση του δεύτερου αντιβιωτικού. Οπότε χρησιμοποιούμε τη λεγόμενη απική φάντασμα. Δηλαδή παίρνουμε αποτύπωμα τη καλλιέργεια σε ένα χαρτί και στο χαρτί αυτό βάζουμε το αντιβιωτικό, ούτω ώστε να μπορούμε να δούμε ποια βακτήρια πέθανα και από τη σύγκριση να καταλάβουμε τη θέση των επιθυμητών απικείων.
Γι' αυτή τη λεπτομέρεια γίνεται πολλέ λόγο σε βοηθήματα και γίνεται και λόγο. Γιατί ουσιαστικά αναφερόμαστε σε ένα κομμάτι που δεν επεξιγείται με την αυστηρή έννοια τη ύληση του σχολικού. Υπάρχει όμω τι ασκήσει του σχολικού και έχει εξεταστεί πολλέ φορέ σαν θέμα. Εντάξει, δεν είναι κάτι τρομακτικό. Απλώ χρησιμοποιούμε ένα τέχνα για να μην πεθάνει τα βακτήρια που θέλουμε να επιλέξουμε.
Αυτό είναι το κόνσεπτ. Άρα λοιπόν, το βακτήριο που έχει προσλάβει ένα συνδυασμένο πλασμήδιο, πολλασιάζεται και δημιουργεί έναν κλώνο. Οπότε το σύνολο των βακτήριακών κλώνα θα περιέχει το συνολικό DNA του οργανισμού μου δότη και αποτελεί τη γωνιωματική βιβλιοθήκη, όπου κάθε κλώνο έχει ένα άλλο κομμάτι, διαφορετικό από τον υπόλοιπων κλώνον σε πάρα πολλά αντίγραφα.
Στο τέλο, τώρα για να επιλέξω τον κλώνο που θέλω. Χρησιμοποιώ αννούχη. Θα το πούμε τώρα σε λίγο και αυτό. Δύο πράγματα ακόμα. Πολλέ φορέ μα ζητάνε χαρακτηριστικά πλασμηδίων για χρήση ω φορέ κλονοποίηση. Θα πω ότι πρέπει να έχουμε αυστηρά μία θέση αναγνωρίση. Θα πω ότι χρειαζόμαστε θέσει ένα εξαγραφή. Άρα δεν επιλέγουμε σε ασκήσει περιοριστικέ που κόβουν πάνω στη θέα.
Σα κρύβουν τη θέα. Καταλαβαίνετε. Old Fasion Humor τώρα αυτό. Συγνώμη γι' αυτό. Λοιπόν, γονεί ανθατρικότητα ή άλλα γονίδια δίκτη ή μάρτυρα. Αν τώρα θέλετε να γίνει η έκφραση, προσέχεται να υπάρχει υποκλιτή ανάλογα την άσκηση. Και θα πω και κάτι άλλο το οποίο δεν αναφέρεται, αλλά είναι κατά ένα τρόπο χαρακτηριστικό, α πούμε.
Γενικά, μικρότερο μεγέθου φορεί εσέρχονται λίγο πιο εύκολα σε βακτήρια. Το λέω, αυτό απλά για να υπάρχει. Τώρα οι βακτοριακίνοικο ξενιστέ τι ιδιότητε πρέπει να έχουν, εντάξει, και αυτά τα έχουμε αναφέρει λίγο πολύ. Δεν θέλουμε να έχουν δεκάτου πλασμήδια. Δεν θέλουμε να έχουν δικέ του περιοριστικέ. Θέλουμε να είναι δεκτικά στο μετασχημό.
Θέλουν να δημιουργούν έτσι ωραίε απλή, σορατέ, ευδιάκριτικέ κτλ. Να μπορεί να ξέρει ο ερευνητή ότι έχει γίνει η δουλειά του, και εννοείστε πολύ ευτυχισμένοι. Έχουμε μάθει, έχουμε καταλάβει την γωνιβωματική με χρήση πλασμή. Μα πετάει το σχολικό και του βακτηριοφάγου. Σου λέει, Αίταξε να δει, όταν έχει ένα μεγαλύτερο γωνιώματο οργανισμό που θέλει να κλονοποιήσει το DNA του.
Καλύτερα χρησιμοποιείται βακτηριοφάγο λάμδα, γιατί είναι ένα ⁇ φορέα που ενσωματών μεγαλύτερα κομμάτια. Αυτή είναι τώρα η διαδικασία κατασκευή χωνειδηματική βιβλιοθήκη με χρήση φάγου. Και εδώ έχω να σχολιάσω ότι υπάρχουν περισσότερα βήματα, δηλαδή ο βακτηριοφάγο πρέπει να υποστεί διαχωρισμό πρωτευν και DNA. Πρέπει να πακιστεί ξανά μετά τη δημιουργία του ανασυνδιασμένου.
Όμω, θα σου κάνει έναν πιο εύκολο μετασχημό. Για τη δουλειά του φάγου είναι η μόνηση του βακτηριακού κοιτά. Και θα σου δώσω και κλονοπίση δυνατότητα κλονοποίη κομματιών μεγαλύτερη μεγέθου. Όπω ξαναίπα. Είναι λίγο πιο περίπτωση διαδικασία αυτή. Αναφέρεται ελάχιστη στη θεωρία και στην εικόνα 4-4. Και κάπω έτσι ολοκληρώνεται η μελέτη μα στην κορδυματική φυλαθήκη.
Και είμαστε έτοιμοι για τι είναι. Γενικά, πιστεύω ότι δεν μαθαίνεται σήμερα. Το γεγονό ότι κάποια γωνίδια μεταγράφονται σε συγκεκριμένα κύτταρα. Θα έχουμε ξαναφέρει. Αυτά έχουμε γράψει και την συνδυαστική ερώτηση που περιλαμβάνει γονίδια που μεταγράφονται σε συγκεκριμένα κύτταρα. Αν λοιπόν θέλουμε να κλονοποιήσουμε αυτά τα γονίδια, δηλαδή μόνο τα γονίδια που εκφράζονται σε ένα συγκεκριμένο κηνταρικό τύπο, τότε φτιάχνουμε στη DNA βιβλιοθήκη.
Οι ΣDΕ βιβλιοθήκε ⁇ περιέχουν αντίγραφα τον ένα ρενέ όλων των γονείδίων που εκφράζονται στα κύτταρα αυτά και παρέχουν το πλεονέκτημα απομόνωση μόνο των αλληλεγγύρων των γονείων που μεταφράζονται, δηλαδή τον εξωνί. Δεν κρατιέμε, θα το πω. Κοιτάξτε. Τώρα τι γίνεται. Δεν με γεμίζει χαρά με ένα αυτό ορισμό να μου προκαλεί χαρούμενα συναισθήματα.
Εγώ θα έλεγα απλό ότι αυτό είναι ο ορισμό που πρέπει να γνωρίζουμε και να γράφουμε. Είναι ο επίσημη ορισμό, πάμε με βάση το σχολικό, δεν αυτό σχεδιάζουμε, δεν βγάζουμε δικέ μα θεωρίε. Όλα αυτά τα ξέρετε. Θα σα ⁇ πωρέκο. Ότι η CDNA βιβλιοθήκη περιέχει τι περιοχέ του DNA που αντιστοιχούν σε όρημο εμαρά. Όταν μπερδεύεστε και δεν ξέρετε τι περιέχει η CDN δε θυμόσαστε.
Θα ξέρετε ότι ό,τι αλληλοχία υπάρχει σε όρημο εμαρή θα υπάρχει και στου ⁇ κλώνου τη CDNA βιβλιοθήκη. Οκ. Συγκρίνοντα τώρα με την γωνιωματική που μελετά με τόση ώρα. Στη γωνιδιωματική έχετε στο σύνολο των κλώνα το συνολικό γονδίμα. Δηλαδή, ρυθμιστικέ περιοχέ, εισόνια τα πάντα. Και θα μπορούσα να πω και σε ακανόνιστα κομμάτια.
Γιατί η θέση αναγνώριση είναι τυχέ πάνω στο γονιδήωμα σε ολόκληρο γονιδίωμα. Αντιθέτω, οι κλώνητη CDN περιέχουν γονίδια. Κάθε κλώνονται γονείδιο χωρί στα εσώνει του. Δεν είναι ακαλιστά τα κομμάτια και δεν έχω το πλήθο των κλώνων που έχω σε μια γωνιωματική βιβλιοθήκη. Γίνεται με σημείο αναφορά τα γωνίδια που εκφράζονται.
Οκ. Σα θυμίζω λίγο διαδικασία κατασκευή SDN βιβλιοθικών απομονώνουμε το συνολικό όρημα MRN από κύτρα που γνωρίζουν ότι εκφράζουν το συγκεκριμένο γονίδιο. Πολύ σημαντικό σημείο αυτό. Δεν πάω να φτιάξω ΣDNA κιτάρων, πρόδρομων ρηθρών και να περιμένω να βρω μέσα την σουλήνη. Αν θέλω να βρω τηνλήνη, πρέπει να πάρω ειδικά παγκατικά κύτταρα που την εκφράζουν, άρα μεταξύ των όριμων MRNA που θα παράγουν, θα βρίσκεται και το δικό μου.
Εντάξει. Το MRNA αυτό χρησιμοποιείται ω καλούπι για τη σύνθεση μια συμπληρωματική αλυσίδα DNA που λέγεται C DNA, complementary DNA δηλαδή, με τη χρήση τη αντίστροφυρ μεταγραφή. Εδώ κάνω μία εβίτρο αντίστροφη μεταγραφή και φτιάχνω ουσιαστικά χειροκίνητα τη μη κουδική αλυσίδα με καλύπιτο εμραί, χωρί όμω σεσώνια. Γιατί το καλύπτο μου είναι όρημα εμαρμένη.
Συνεχίζουμε. Εφόσον έχουμε δημιουργήσει ιδρικά μόρια που αποτελούνται από μία λυσίδα σε DNA και μια λυσίδα εμαρή. Κάνουμε αποδιάξη με θέρμανση με χημικέ ⁇ ουσίε ⁇ και καταστρέφουμε την εμαρμένη αλυσίδα. Δεν τη χρειαζόμαστε πια. Θέλουμε να πάμε σε δίκλωνο DNA. Οπότε με καλούπιση DNA και χρήση τη DNA πολυμεράσει δημιουργούμε τη συμπληρωματική αλυσίδα DNA.
Τα δίκλωνα μόρια αυτά. Συνήθω κατόπιν επεξεργασία για την προσθήκη μόκλωων άκρων, με τη χρήση περιοριστική ενδων κλάση και μία DNA δεσμάσει ήσονται σε πλασμήδια ή βακτηριοφάγου και κλονοποιούνται όπω και στην γωνιωματική μετασχηνοντα ⁇ κυταραξενιστέ και δημιουργώντα τελικά του κλώνου τη βιβλιοθήκη αυτή. Η διαδικασία κατασκευή έχει χρησιμοποιηθεί και σε θέμα δέκα.
Έχουν χρησιμοποιήσει MRNA και αλυσίδα DNA απέναντι που έπρεπε να βρει σαν είναι οικοδική, η μοικοδική κτλ. Εύκολα ερωτήματα. Είναι πολύ σημαντικό να έχουμε καταλάβει ότι μιλάμε για τα γωνίδια που εκφράζονται και μόνο αυτά. Άρα πρέπει να επιλέγετε ο σωστό κιταρικό τύπο. Δεν σημαίνει ότι θα τα βρω όλα τα γονίδια που υπάρχουν σε αυτά τα κύτταρα, ότι θα βρω τα ενεργά γονεί.
Εντάξει. Είναι σημαντικό να θυμάμαι ποια ένδειγμα χρησιμοποιούνται. Αντίστοι, πολυμεράση, περιοριστική και δεσμάσει. Έτσι θα λέω λίγο πιο γρήγορα εφόσον τα είπαμε και αναλυτικά για να μην σα κουράζω. Και πάμε τώρα στο τι αλληλοχία περιλαμβάνει και τι δεν περιλαμβάνει μια DNA βιβλιοθήκη. Ένα αστεράκι θα βάλω. Γιατί συνήθω με ρωτάνε μα, αν οι πέντε και οι τρία μετάφραση τη περιοχή περιλαμβάνονται σε αυτό το τίποτη τη βιβλιοθήκη.
Φυσικά περιλαμβάνονται. Ότι υπάρχει στο όρημα ή μαρνα ή περιλαμβάνεται. Τι δεν περιλαμβάνεται, τι αλληλοχίε δεν περιλαμβάνονται, δεν περιλαμβάνονται εισόδηνια. Δεν περιλαμβάνονται υποκλινητέ αλληλεγγύρίε λίξη μεταγραφή. Γονίδια που παράγουν τα ρεναίη ένα ρεναί και σε ένα ρεναί. Δεν περιλαμβάνεται μη γωνίδια. Ή ανεργά γονεί.
Αυτέ είναι δύο διαφορετικέ κατηγορίε. Άλλον έχω ένα γονίδιο το οποίο δεν εκφράζεται στα συγκεκριμένα κύτταρα. Άλλο έχω μία περιοχή που δεν είναι γονίδιο. Δεν αποτελεί γονίδιο. Και οι δύο κατηγορίε δεν θα υπάρχουν στη DNA. Και πότε γνωρίζω, δεν συμπεριλαμβάνεται και τα μειτοχοντριακά γονίδια. Αυτό βέβαια έχει να κάνει περισσότερο με το πρωτόκολλο που ακολουθείτε.
Έτσι με τη διαδικασία κατασκευή, δηλαδή. Πολλέ φορέ έχουν χρησιμοποιήσει εκταστέματα του τι που έχετε α πούμε δύο κύτταρα, ένα απατικό και ένα πακρατικό από τον ίδιο οργανισμό. Θα έχουν ίδια η διαφορετική γωνιβωματική βιβλιοθήκη. Θα έχουν ίδια γωνιωματική εφόσον έχουν το ίδιο DNA. Θα έχουν ίδια η διαφορετική DNA βιβλιοθήκη.
Εφόσουν διαφορετικοί κυταρικοί τύποι, θα εκφράζουν διαφορετικέ ομάδε ⁇ γωνειδίων. Άρα θα έχω διαφορετικέ βιβλιοθήκε. Ωστόσο, θα υπάρχουν και κλώνοι οι οποίοι θα είναι κίνηση. Δηλαδή, υπάρχουν και γονίδια που εκφράζονται και στα δύο αυτά οι δικητάρα. Έχουμε μάθει πολλά γονίδια, τα οποία είναι ενεργά σε διάφορου κοιταικού τύπου.
Και κάνανε α πούμε έτσι, λίγο τη διαφορά στι πανελίξει, νομίζω είχαν του 23 καλά. Μπορώτησαν γορτιωματική βιβλιοθήκη σπερματοζοαρία του ίδιου οργανισμού, θα είναι ίδια διαφορετική. Εντάξει, τώρα δεν το λέει και δύσκολο. Γιατί τα σπερματοζόρα δεν έχουν μέσα το ίδιο DNA. Άρα δεν λέμε να λευκή επιταγή επειδή είναι από τον ίδιο οργανισμό.
Κητάμε και τι κύτταρο έχουμε. Όταν έχουμε ένα γαμτή και λόγω ανεξάρτητα του συνδυασμού. Αλλά και εδώ επειδή έκανε μπάμει γιατί με ρωτούσε για αρσελικά άτομα, έχω το χύτοψή. Πάει το μυαλό μου ότι μπορεί να είναι διαφορετική. Και στα δύο είδη βιβλιοθών που αναφέραμε, και στου δύο αυτού ⁇ τρόπου κλονοποιήσει DNA, η επιλογή του επιθυμητού κλώνα γίνεται με τη χρήση κατάλληλ μερων ανοιχνευτών.
Και γι' αυτό το λόγο για να μιλήσουμε για ανοιχνευτέ, χρειάζεται να μιλήσουμε για τι διαδικασίε τη αποδιάταξη και τη εμβρηση. Δύο ένιερε τι οποίε οι μαθητέ δεν αντιμετωπίζουν ιδιαίτερη δυσκολία στο να τη κατανοήσουν. Αν επιδράσουμε στο DNA με κατάλληλα χημικά ή με αύξηση τη θερμοκρασία, τότε οι δεσμείου ανάμεσα στι συμπληρωματικέ αλυσίδε θα σπάσουν, οι αλυσίδε αποχωρίζονται η μία την άλλη και η διαδικασία αυτή λέγεται αποδιάταξη.
Εάν τώρα οι μονόκλωνε συμπληρωματικέ αλυσίδε βρεθούν σε κατάλληλε συνθήκε, μπορούν να επανασυνθούν δημιουργώντα ξανά του δεσμού υδρογόλου ανάμεσα στι συμπληρωματικέ βάσει. Και αυτή η διαδικασία λέγεται η βρηδοποίηση, δηλαδή η σύνδεση μονόκλων συμπληρωματικών αλυσίδων DNA, DNA RNA, ακόμα και RNA RNA. Η βρηδοποίηση είναι μια ιδιότητα που μου δίνει τη δυνατότητα να χρησιμοποιήσω ένα γνωστό μόριο DNA όσο ανοιχνευτεί για τον εντοπισμό του συμπληρωματικού του ακόμα και όταν αυτό βρίσκεται ανάμεσα σε χιλιάδε άλλα κομμάτια.
Οπότε σκεφτείτε τώρα ότι σε μια γονοδυματική ή σε μια CDNA έχουμε ένα πολύ μεγάλο αριθμό κλονοποιημένων τμήμάτων λόγω τη δράση των περιοριστικών εδώ κλασών. Οπότε πρέπει μέσα σε αυτά τα κομμάτια να βρούμε αυτό για το οποίο κάναμε όλη αυτή τη φασαρία. Και η τεχνική που χρησιμοποιούμε κυρίω περιλαμβάνει τη χρήση χιθετημένων μορών ανοιχνευτών.
Μιλάμε για μονόκλωνα μόρια DNA ή RNA, ηχυθετημένα, που περιέχουν αλληλεγγύη συμπληρωματικέ ω προ το κλονοποιημένο DNA, ω προ το DNA που θέλουμε να ανυχνεύσουμε να βρούμε. Ο ανοιχνευτή αναμεινείται με το DNA τη βιβλιοθήκη, το οποίο φυσικά έχει αποδιαταχθεί και ερηδοποεί το συμπληρωματικό του κομμάτι. Συνήθω εδώ πέρα συζητάμε στο μάθημα τι προποθέσει δράση του ανοιχνευτή.
Δηλαδή, τι χρειάζεται η παιδί μου για να δράσει ένα ανοιχνευτή. Και συζητάμε με τα παιδιά. Αναφερόμαστε σε ένα πολύ ωραίο παράδειγμα. Το παράδειγμα του πάρει. Έτσι το λέω εγώ στο μάθημα. Πάμε λοιπόν να συζητού για την περιβόλητη θεωρία του πάρτι. Κίναστε, πλένεστε, αρματίζετε και μου είστε ωραία το καλά μου. Όχι σε περίοδο πανελυμίων.
Εντάξει, κάποιο άλλο σάβατο. Και σα ⁇ λέει το κολόσα τη κουρτή σα ⁇ . Έχω υπόψη μου ένα πάρτι στο οποίο έχει πολύ ενδιαφέρον άτομα. Ελεύθετε στα. Πάμε έτσι να δούμε τι παίζει να συναντούμε με ενδιαφέρουσε προσωπικότητε ⁇ και από εκεί και πέρα ξέρετε ότι θέλω προκύψει. Έχει τι ⁇ ψήνε ⁇ τίνεται και όλα αυτά. Ετοκιμάζεται, πάτε σε αυτό το πάρτε και να δείτε μέσα με το κουμπίτε.
Αυτή φαντάζεται σε μουσική χορό! Και ενδιαφέρε ⁇ προσωπικότητε. Αλλά εσέχει συναντάτε γύρω σα ⁇ μόνο σε φωτά. Φιλιάζε καιτάτε περίεργη το φίλο σα ⁇ και τη φίλη σα. Στο οποίο σου αυτή την φαίνεται ιδέα. Και μέσα σα σκέφτεστε ότι αποκλείται να βρω κάποιον ενδιαφέρον τίποτα όταν ήδη είναι όλοι σε βγάλια. Ποια είναι λοιπόν η πρώτη προπόθεση φράση του ανοιχτε.
Τάν για αποδιάταση φυσικά. Πρέπει όλοι να είναι μονόκλωνοι για να μπορεί ο ανοιχτε να ειδικοποιήσει κάποια λυλία. Εντάξει, ώρα θα πρέπει να προηγηθεί από διάταξη. Δεύτερη προπόθεση. Πάλι το ίδιο σκηνικό. Νίστε πλέον στη κλπ. Πηγαίνετε να πάρει. Γεμάτω προσωπικό. Σα στραβάει το ενδιαφέρον. Αλλά αν θα συζητήσετε με κάποιου ⁇ από αυτού, θα δείτε ότι δεν ταιριάζετε που θενά.
Δεν υπάρχει λοιπόν περίπτωση να δράσει ονοιχνε. Εάν δεν είναι συμπληρωματικό με το κλονοποιημένο DNA. Αλλιώ άμα δεν ταιριζεσ, δεν συμπεθενάζει να το πω. Λαϊκά. Δεύτερη προπόθεση είναι η συμπληρωματικότητα. Τρίτη προπόθεση τόσο πιο ενδιαφέροντα και απλή θα ήταν η ζωή σα. Εάν εσεί ⁇ το ενδιαφέρον πρόσωπο ήταν πόσα να το πω κόμψα, φοσίζεται.
Θα έβλεπω ένα στον άλλον ότι υπάρχει ενδιαφέρον. Έτσι, δεν θα αναρωθιόσασταν. Μου στείλετε το χεράκι, τι σημαίνει το χεράκι, μου έγραψε και το καλά, δεν μου έγραψε καλά εσύ. Γενικά παιδιά τώρα, εντάξει, μεταξύ μα είμαστε. Όταν στέλνε το ολόκλο κείμενο και σα πατάει ο άλλο χεράκι, οκ, καλά και τέτοια. Εμπατέστε, δεν ενδιαφέρεται.
Εντάξει, κλείνω αυτή την παρέντηση. Και θα πω την τρίτη προπόθεση δράση ανιχνευτή, που είναι η χνηθέτηση. Είναι πάρα πολύ σημαντικό να είναι συμασμένο ο ανοιχτερή για να μπορεί να φάνηπου προσταίεται. Εντάξει, αυτά λοιπόν για του ανιχνευτέ. Και πάμε αγαπημένη μου να κλείσουμε αυτό το επεισόδιο με τον τρίτο τρόπο κλονοποίηση DNA.
Έχουμε μάθει γωνιωματική, έχουμε μάθει την DNA βιβλιοθήκη. Και η επανάσταση στην κλονοποίηση του DNA έρχεται με τον τρίτο τρόπο. Είναι η αλυσίτη αντίδραση πολυμεράση IPCR ο τρίτο ⁇ τρόπο κλονοποίηση DNA, η οποία είναι μια μέθοδο στην οποία μα ⁇ βοηθάει να αντιγράφουμε επιλεκτικά εκατομμύρια φορέ, μια ειδική αλληλοχία DNA μέσα από ένα σύνθετο μείγμα μορών DNA χωρί να μεσολαβεί ζωντανό κύτταρο.
Η τεχνική αυτή άρχισε να εφαρμόζεται το 1985 και έπειτα, Εβραίω, βέβαια ανακαλύφθηκε το 1983 πρέπει να σα πω. Στο 85 θυμάστε κλαστικά. Και έχει αυξήσει πάρα πολύ την ευσησία των γενετικών αναλύσεων. Έχει πάρα πολλέ πρακτικέ εφαρμογέ και χρησιμοποιείται έκτοτε μέχρι και σήμερα με πάρα πολλέ βελτιώσει και αναβαθμίσει στην ιατρική στο κομμάτι τη διάγνωση, στην εγκληματολογία.
Έχει αλλάξει τελείω στην ιατροδικαστική για τη διαλεύκανση υποθέσεων και εγκλημάτων. Και φυσικά στα απολυθώματα. Η PCR ανακαλύθηκε από ένα βιοχημικό επιστήμονατον τώρα πώ ακριβώ προφέρεται αυτό το πράγμα. Νομίζω Κάριμ. Αυτό λοιπόν, ήταν ένα βιοχημικό που δούλευε στην Καλφόρια, δούλευε σε μια εταιρεία και λέγεται, θυμολείται ότι η ιδέα για την πισάρτου ήρθε η στομάξι καθώ οδηγούσε.
Σκέφτηκε: α, μήπω μπορούμε να αντιγράφουμε DNA και να χρησιμοποιούμε ένα είδο φωτοτυπικού μηχανήματο για την αντιγραφή του DNA τη γρήγορη νύττρο αντιγραφή του DNA. Και το σκέφτηκε αυτό μην έχετε καθώ οδηγού. Η ιδέα του. Βασίστηκε στο μηχανισμό από διάταξη. Σύζευξη, επανασύνδεση εκείνη, δηλαδή, που είναι σαν προταρχικά, αλλά είναι DNA τμήματα.
Επιμέκηνση, DNA πολυμεράση και ξανά από την αρχή. Ουσιαστικά το πρώτο πρόβλημα ήταν ότι DNA πολυμεράση καταστρεφόταν μετά τον πρώτο κύκλο. Αλλά μετά που ανακαλύστηκαν. Όχι, ανακαλύστηκαν. Ανακαλύστηκε ότι μπορούμε να απομονώσουμε πολυμεράση από οργανισμού που ζουν σε θερμοπιγέ. Οπότε αυτή άντει τα πάνω κάτω τη θερμότητα, λύθηκε αυτό το πρόβλημα.
Και έτσι άρχισε πλέον η μαζική εφαρμογή τη PC. Φυσικά ο τύπο αυτό πήρε Νόμπελ το 1993. Αν και γενικά εντάξει, αυτό σαν προσωπικό, τα παιδιά. Ήταν έτσι λίγο όχυ, ήταν αντισυμβατικό. Είχε παραδείχν ότι παίρνει η παρεσθηση ογόνα, LSD κτλ. Ήταν ένα άνθρωπο που πούλησε για ψύχουλα αυτή την ιδέα. Εντάξει, ο άνθρωπο το ζούσε τελείω διαφορετικά.
Και μπορούμε να πούμε ότι έβλαπτε κάπω στον εαυτό του, αλλά η ανακάλυψή του βοήθησε πάρα πολύ τον κόσμο, όχι μόνο την επιστημονική κοινότητα, αλλά και τον απλό κόσμο. Δύο πράγματα θέλω να πω για την ΠΆρω ότι εξαζήζα να θυμάστε. Το ένα είναι ότι ο αριθμό των μερών DNA αυξάνεται εκθετικά. Οπότε πάλι μου χρησιμοποιείται το δύο ή στιγμή, όπου είναι ο αριθμό των κύκλων.
Δεν κάνουμε απλή μέθοδο των τριών, δεν αυξάνεται αναλογικά, αυξάνεται εκθετικά. Και το δεύτερο είναι ότι όταν έχουμε μόριο DNA το οποίο ετοιμάζεται ένα αντιγραφεί με PCR. Σκεφτόμαστε ότι πάντα ο καινούργιο κλένο συντίθεται 5 προ 3. Δεν υπάρχει μια συνεχή σύνδεση γιατί είμαστε εβίντρο. Και επειδή δεν υπάρχει και κανένα να αντικαταστήσει τα πρωταρχικά RNA με DNA, χρησιμοποιούμε εξαρχέ DNA εκιτέ ⁇ .
Αυτά είχα να σα ⁇ πω. Αυτό το κεφάλαιο μπορώ να πω ότι είναι μικρή η θεωρία του, αλλά είναι θαυματουργό ασκησιακά. Οπότε θα συμβουλεύω να λύσετε πάρα πολλέ ασκήσει ⁇ και αυστηρά κεφαλαίου 4, δηλαδή επιλογοί, χάρτε, σχήματα, μικη κτλ. Αλλά και συνδυαστικά με κεφάλαιο 5 γιατί χρησιμοποιείται πολύ και συνδυαστικά με γενελογικά δέντρα.
Ήτιδήποτε γενικά συνδυαστική άσκηση βρίσκεται μπροστά σα, γιατί είναι ένα κεφάλι που συνδυάζεται πάρα πολύ και με 2 και με 5 ή ανάλογα από πόσο φαντασία θέλει να βάλει αυτό που το δουλεύει. Εγώ γενικά έχω φαντασία, το ξέρουν αυτό και οι μαθητέ. Λοιπόν, θέλω να σα χαιρετήσω προ το παρόν. Θα τα ξαναπούμε στο κεφάλο 5, στην εθελοντική κυρνουτητα.
Σα έχουμε τεράστια επιτυχία και πολύ πολύ γεια σα!
Σχόλια
Χωρίς σχόλιαΣυνδεθείτε για να συμμετάσχετε στη συζήτηση
Σύνδεση για ΣχολιασμόΔεν υπάρχουν σχόλια ακόμα
